Proyectos de investigación

La hiperplexia (OMIM 149400), es un síndrome clínico raro caracterizado por respuestas de sobresalto exageradas e hipertonía neonatal que puede ser letal en neonatos. Se origina por mutaciones de falta de función de proteínas cruciales para la neurotransmisión glicinérgica como el transportador neuronal GlyT2 (gen SLC6A5). En este año hemos continuado con la caracterización de la nueva variante identificada de GlyT2 en un paciente infantil de hiperplexia en Reino Unido. Hemos avanzado demostrando una mayor interacción del mutante con la chaperona calnexina en retículo endoplásmico desde donde es abundantemente degradado. Mediante etiquetado diferencial y coexpresión de transportadores silvestre y mutante hemos comprobado que el tráfico silvestre no es alterado, descartando una acción dominante negativa. Para el rescate de este y otros mutantes de hiperplexia usamos los ligandos que previamente establecimos como chaperonas químicas.

Otro objetivo nos llevó a reconocer que una serín-proteasa (y no calpaína) es la responsable de la proteolisis diferencial de otra variante de hiperplexia que genera un fragmento N-terminal que puede obstaculizar ciertas interacciones de GlyT2. Finalmente, para estudiar el efecto de las mutaciones de hiperplexia sobre vías de señalización que controlan el desarrollo perinatal de GlyT2, estudiamos las cascadas de señalización que afectan a la colocalización de GlyT2 con la proteína marcadora de diferenciación neuronal Gap43 en células PC12 diferenciadas con NGF. También estudiamos cómo estas cascadas regulan a GlyT2 en neuronas primarias. La regulación de GlyT2 por la vía de hedgehog evidenciada por nuestro grupo, se ha hecho extensiva a mutantes seleccionados con alteraciones en ubiquitinación en neuronas primarias para evaluar posibles defectos en esta regulación. Este proyecto nos llevará a conocer la contribución del desarrollo a los fenotipos de hiperplexia humana en varios sistemas experimentales que deseamos finalmente evaluar en un sistema in vivo como el de pez cebra.