Proyectos de investigación

Nuestro proyecto de investigación ha intentado esclarecer el papel de Reelina, una proteína que en cerebro adulto regula formación de memoria y plasticidad sináptica, en la demencia de Alzheimer. Nuestra hipótesis de trabajo es que su expresión está aumentada en el cerebro de enfermos de Alzheimer, pero la funcionalidad de su vía de señalización es deficiente. Para estudiar estos aspectos hemos planteado examinar la posible regulación genética y epigenética de Reelina en la EA, principalmente a través del estado de metilación de su promotor, y la influencia que el péptido β-amiloide (o Aβ) pueda tener en la misma.

Respecto a los niveles de expresión en cerebro de sujetos con Alzheimer, hemos confirmado por estudio de Western blot y ELISA aumentos en los niveles de proteína Reelina, que además se distribuye entre fracción soluble y ligada al β-amiloide; por PCR también confirmamos el aumento del mensajero de Reelina. En condiciones no patológicas la unión de Reelina a su receptor ApoER2 promueve el procesamiento proteolítico del mismo, generándose fragmentos intracelulares que hemos localizado en núcleo interaccionando con el promotor de Reelina y disminuyendo su expresión. Estos fragmentos de ApoER2 se generan por procesamiento mediante la actividad de complejo γ-secretasa, fundamental en la generación del Aβ.

De otro lado hemos demostrado que la inhibición de la actividad metil transferasa (DNMT1) en núcleo también promueve cambios en los niveles transcripcionales de Reelin. Sin embrago, aunque tras tratamiento in vitro con Aβ la expresión de Reelina aumenta, en paralelo a la disminución de los niveles de metil transferasa (DNMT1) en núcleo, no hemos sido capaces de observar cambios en la metilación del promotor (ensayos de PCR de metilación). Actualmente estamos refinando dicho análisis por secuenciación de la región promotora, tanto para los ensayos in vitro como el promotor de Reelina obtenido de cerebro de sujetos con Alzheimer.