Las distrofias hereditarias de la retina afectan a 1 en 4.000 indivíduos, comprometiendo la función visual. La obtención de un tratamiento para estas enfermedades monogenéticas se ve dificultada por su gran heterogeneidad, al estar causadas por mutaciones en más de 200 genes. Estas enfermedades constituyen una necesidad médica por resolver.

El objetivo principal de este proyecto es probar si el grupo de distrofias de retina causadas por una elevación anormal de los niveles de cGMP en células fotorreceptor (referidos como “trastornos del cGMP") pueden tratarse mediante la inhibición del enzima inosina monofosfato deshidrogenasa 1 (IMPDH1). Los “trastornos del cGMP” incluyen las formas de ceguera hereditaria causada por mutaciones en los genes PDE6A, PDE6B, PDE6G, AIPL1 e IMPDH1 de bastón, que representan un porcentaje significativo de las familias afectadas en España. El proyecto aborda tres objetivos específicos.

El objetivo 1 consistirá en desarrollar un reactivo, referido como IMPDH1-shRNA-SLP, que silencie eficientemente la actividad de IMPDH1 en líneas celulares. Este reactivo se basará en un shRNA para IMPDH1 encapsulado en nanopartículas lipídicas sólidas. Para ello se sintetizará una colección de shRNAs que será ensayada en las líneas celulares 661W y ARPE19 para seleccionar el shRNA más eficaz contra las isoformas de splicing de retina. El shRNA seleccionado se clonará en un vector de expresión que será encapsulado en nanopartículas lipídicas sólidas para llevar a cabo ensayos in vivo mediante administración intravítrea.

De esta manera se obtendrá el medicamento en una formulación trasladable a pacientes. El objetivo 2 consistirá en probar el reactivo desarrollado en el rescate fenotípico de un modelo preclínico de ratón que expresa la mutación D226N en el gen IMPDH1, prevalente y representativa de la retinosis pigmentaria tipo 10. Este modelo preclínico, un “avatar” de la mayoría de afectados de RP10 en España, es exclusivo del laboratorio. El objetivo 3 consistirá en probar el rescate fenotípico de ratones rd10 (modelo de retinosis pigmentaria autosómica recesiva por mutaciones en PDE6B) mediante tratamiento con IMPDH1-shRNA-SLP, para probar la validez de esta formulación farmacológica en el tratamiento genérico de los "trastornos del cGMP", con independencia del gen causal. Dos grandes ventajas del uso de nanopartículas lipídicas sobre el uso de vectores virales son: i) su capacidad de dirigir la expresión de un gen a la capa de fotorreceptores de la retina mediante inyección intravítrea; y ii) un perfil de seguridad mucho más favorable que los vectores virales en términos de provocar respuestas inmunes.