Proyectos de investigación

La vía de señalización de los esfingolípidos proporciona una respuesta a situaciones de estrés celular, conduciendo finalmente a la apoptosis. La infección bacteriana es una causa importante de estrés. En el último semestre de este proyecto, se centró la investigación en el papel de los esfingolípidos en la entrada de bacterias en células eucariotas. Se ha propuesto que una serie de bacterias patógenas infectan la célula de mamífero a través de la activación de la esfingomielinasa ácida en la membrana plasmática y la posterior generación de ceramidas. Para probar esta hipótesis, se ha desarrollado una cepa de E. coli que contiene una proteína fluorescente verde (GFP), que nos permite visualizar la bacteria cuando se internaliza en células de mamífero. Las células LY-B de mamíferos, derivadas de las células CHOK1, carecen de la transferasa de palmitato de serina, la primera enzima en la vía biosintética de los esfingolípidos. Por lo tanto, el contenido de esfingomielina de las células LY-B se puede modular modificando la concentración de esfingolípidos en el medio de cultivo. La entrada de E. coli marcada con GFP en células CHOK1 o LY-B que contienen cantidades variables de esfingomielina se ha cuantificado utilizando microscopía de fluorescencia confocal. Se concluyó que la entrada de E. coli se vio facilitada notablemente por la presencia de esfingomielina en la membrana plasmática celular, y que la reducción del contenido de esfingomielina en las células diana condujo a una disminución de los niveles de infección. Además, la inhibición de la esfingomielina ácida de la membrana plasmática dificultó la infección bacteriana, mientras que la inhibición de la esfingomielina neutra del aparato de Golgi facilitó la infección. El agente reductor ascorbato inhibió fuertemente la infección, presumiblemente al contrarrestar el H₂O₂ generado por las bacterias, a su vez un activador conocido de la esfingomielinasa ácida.